用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室耗材有很多種，進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的基本設(shè)備如下：
設(shè)備 | 有益設(shè)備 | 有用的附加設(shè)備 |
振蕩培養(yǎng)箱 | 生物安全柜 | 低溫冷凍柜 |
顯微鏡 | 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 | 玻璃器皿清洗機(jī) |
滅菌器 | 真空泵 | 菌落柜臺(tái) |
清洗儀器 | 二氧化碳培養(yǎng)箱 | 共聚焦顯微鏡 |
殺菌干燥箱 | 制備和質(zhì)量控制 | 熒光激活細(xì)胞分選儀 |
離心機(jī) | 溫度記錄 | |
純水機(jī) | 細(xì)胞生物反應(yīng)器 | |
液氮罐 | 移液器和自動(dòng)移液器 | |
水浴鍋 |
1. 無(wú)菌工作區(qū)/細(xì)胞培養(yǎng)罩（即層流罩或生物安全柜）
2. 培養(yǎng)箱（推薦使用潮濕的二氧化碳培養(yǎng)箱）
3. 水浴
4. 離心機(jī)
5. 冰箱和冰柜 (–20°C)
6. 細(xì)胞計(jì)數(shù)器（例如自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器或血細(xì)胞計(jì)數(shù)器）
7. 倒置顯微鏡
8. 液氮 (N 2 ) 冷凍箱或低溫儲(chǔ)存容器
9. 滅菌器（即高壓滅菌器）
§ 為了保持清潔的細(xì)胞培養(yǎng)工作，如果可能，有必要準(zhǔn)備一個(gè)單獨(dú)的房間或空間。
§ 這個(gè)房間應(yīng)該是密閉的，另外需要配備一個(gè)氣流柜，已提供潔凈的空氣，一些實(shí)驗(yàn)室還會(huì)采用HEPA空氣過(guò)濾器。實(shí)驗(yàn)室必須是為潔培養(yǎng)工作二設(shè)計(jì)，嚴(yán)格限制在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)或附近培養(yǎng)原代動(dòng)物組織和微生物。
§ 實(shí)驗(yàn)室外套應(yīng)放在實(shí)驗(yàn)室入口處，不得在實(shí)驗(yàn)室外使用。
§ 生物安全柜既可以提供無(wú)菌的條件，而且還可以控制傳染性的飛濺物或氣溶膠。
§ 為滿足多樣化的研究需要，生物安全柜一般有I、II、III三類。
§ I 類層安全柜為實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境提供了基本水平的保護(hù)，但它們不能保護(hù)培養(yǎng)物免受污染。 它們?cè)谠O(shè)計(jì)和氣流特性方面與化學(xué)通風(fēng)柜基本相同。
§ 對(duì)于涉及 BSL-1、2 和 3 材料的工作或者細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)為了處理有害物質(zhì)（例如，靈長(zhǎng)類動(dòng)物培養(yǎng)物、病毒感染培養(yǎng)物、放射性同位素、致癌或有毒試劑），應(yīng)使用 II 類生物安全柜。
§ 清潔工作臺(tái)：垂直層流或水平層流潔凈工作臺(tái)是將經(jīng)過(guò) HEPA 過(guò)濾的空氣從機(jī)柜后部穿過(guò)工作臺(tái)表面有助于保護(hù)樣品而不是工作人員。
§ 為了在 30-40 0 C下為細(xì)胞生長(zhǎng)提供合適的溫度環(huán)境，需要一個(gè)培養(yǎng)箱。
§ 根據(jù)培養(yǎng)的細(xì)胞類型，孵育溫度會(huì)有所不同。
§ CO2 振蕩培養(yǎng)箱時(shí)一種可以自動(dòng)進(jìn)行控溫、濕度和氣體調(diào)節(jié)的培養(yǎng)箱，可以使培養(yǎng)基中，CO2 的濃度與碳酸氫鈉保持平衡。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，一般保持培養(yǎng)箱中保持 2-5% CO2 氣體含量。
§ 冰箱和冰柜對(duì)于在 2–8°C 下儲(chǔ)存液體培養(yǎng)基以及在 –5°C 到 –20°C 下儲(chǔ)存酶和某些培養(yǎng)基成分都非常重要。
§ 要儲(chǔ)存培養(yǎng)基和緩沖液，需要冰箱或冷藏室。
§ 需要低溫冰箱來(lái)保存預(yù)先分裝的血清、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和抗生素。
§ 低溫儲(chǔ)存
§ 隨著傳代次數(shù)的增加，連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系遺傳不穩(wěn)定的可能性很大，因此，有必要制備細(xì)胞的工作原液并保存在低溫儲(chǔ)存中。
§ 需要注意的是，細(xì)胞不應(yīng)儲(chǔ)存在 20 o C 或 -80 o C 的冰箱中，因?yàn)楫?dāng)它們不在這些溫度下儲(chǔ)存時(shí)，它們的活力會(huì)降低。
§ 檢查細(xì)胞一般使用倒置顯微鏡即可。
§ 盡管染色體分析或放射自顯影工作需要非常高質(zhì)量的顯微鏡，但放大倍數(shù)為 X100 的簡(jiǎn)單的光學(xué)顯微鏡足以在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器中進(jìn)行常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)。
§ 多種組織培養(yǎng)塑料器皿，最常見(jiàn)的是經(jīng)過(guò)特殊處理的聚苯乙烯。
§ 少量的細(xì)胞培養(yǎng)一般在25 cm2 或 75 cm2培養(yǎng)皿或細(xì)胞培養(yǎng)瓶中進(jìn)行，而后再轉(zhuǎn)移至搖瓶中，置于二氧化碳培養(yǎng)箱中擴(kuò)培，大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)還需要借助生物反應(yīng)器等設(shè)備。
§ 玻璃器皿如移液器應(yīng)浸泡在合適的清潔劑中，然后經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的洗滌程序，在干燥和滅菌之前用蒸餾水*浸泡。
§ 玻璃器皿如移液管、錐形瓶、燒杯（用鋁箔覆蓋）在 160°C 的熱空氣烘箱中消毒一小時(shí)。
§ 所有其他設(shè)備，如自動(dòng)移液器吸頭和瓶子（蓋子松散連接）均通過(guò) 121 °C 高壓滅菌 20 分鐘進(jìn)行滅菌。
§ 為了準(zhǔn)備培養(yǎng)基和沖洗玻璃器皿，需要雙蒸或反滲透水供應(yīng)。
§ 應(yīng)定期檢查雙蒸水的 pH 值，因?yàn)樵谀承┣闆r下可能會(huì)有所不同。
§ 使用的水質(zhì)量的變化可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的變化，因此有必要使用單一來(lái)源的水。
§ 通過(guò)高壓滅菌將水在 121 °C 下滅菌 20 分鐘。
§ 不能高壓滅菌的培養(yǎng)基必須通過(guò)孔徑為 0.22 μm 的膜過(guò)濾器進(jìn)行滅菌。
§ 為了增加細(xì)胞濃度或洗去試劑，細(xì)胞懸液需要進(jìn)行離心操作。
§ 可以使用的離心機(jī)有臺(tái)式離心機(jī)、小型離心機(jī)、落地式離心機(jī)和冷凍離心機(jī)等。
§ 用于動(dòng)物培養(yǎng)的其他附加實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室耗材如下：
§ 蠕動(dòng)泵貨真空泵
§ PH計(jì)
§ 細(xì)胞生物反應(yīng)器【大規(guī)模培養(yǎng)】
§ 共聚焦顯微鏡
§ 流式細(xì)胞儀
§ 細(xì)胞培養(yǎng)瓶
§ 細(xì)胞培養(yǎng)皿
§ 滾瓶或搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶
§ 移液器和移液器吸頭
§ 廢物容器
§ 培養(yǎng)基、血清和試劑
§ 細(xì)胞
1. pH計(jì)：
§ PH計(jì)是一種計(jì)算溶液中氫離子（酸度或堿度）活度的電子儀器。
§ pH 計(jì)必須包括連接到 pH 響應(yīng)電極和參考（不變）電極的電壓表。
§ pH 響應(yīng)電極通常是玻璃，汞-氯化亞汞（甘汞）電極通常是參考電極，但有時(shí)也使用銀-氯化銀電極。
§ 共聚焦顯微鏡是一種特殊類型的標(biāo)準(zhǔn)熒光顯微鏡（也稱為寬場(chǎng)熒光顯微鏡），它使用特定的光學(xué)組件產(chǎn)生用熒光探針染色的材料的高分辨率圖像。
§ 流式細(xì)胞術(shù)是一種細(xì)胞分析方法，在 1950 年代用于確定流體流中的細(xì)胞體積，當(dāng)它們?cè)谟^察孔前流動(dòng)時(shí)，流體流會(huì)快速循環(huán)。
§ 流體、光學(xué)和電子是流式細(xì)胞儀的三個(gè)主要組成部分。
§ 樣品從樣品管到流動(dòng)池的傳輸是流式細(xì)胞儀的流體系統(tǒng)的功能。
§ 樣品要么被分選（在細(xì)胞分選機(jī)的情況下），要么在通過(guò)流通池（并通過(guò)激光）后被運(yùn)送到廢物中。
§ 光學(xué)系統(tǒng)組件包括激發(fā)光源、透鏡和用于在儀器周圍捕獲和移動(dòng)光的濾光片以及光電流產(chǎn)生檢測(cè)系統(tǒng)。
§ 所有的培養(yǎng)細(xì)胞的容器起初都是玻璃的。
§ 與塑料相比，玻璃的缺點(diǎn)包括重量大、成本高、清潔勞動(dòng)強(qiáng)度大和顯微鏡觀察效果差。
§ 1960 年代為聚苯乙烯開(kāi)發(fā)了表面處理技術(shù)，使塑料容器能夠代替玻璃用于大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。
培養(yǎng)瓶瓶說(shuō)明 | 生長(zhǎng)面積(cm 2 ) | 推薦工作體積 (ml) | 細(xì)胞產(chǎn)量 |
T-25 | 25 | 5-10 | 2.5×10 6 |
T-75 | 75 | 15-25 | 7.5×10 6 |
T-150 | 150 | 30-50 | 15.0 X 10 6 |
T-175 | 175 | 35-60 | 17.5 X 10 6 |
T-225 | 225 | 45-75 | 22.5 X 10 6 |
A.。細(xì)胞培養(yǎng)皿：
§ 細(xì)胞培養(yǎng)皿提供了較佳的經(jīng)濟(jì)性和進(jìn)入生長(zhǎng)表面的途徑。
§ 它們應(yīng)該與二氧化碳振蕩培養(yǎng)箱一起使用。
§ 大多數(shù)制造商提供四種培養(yǎng)皿：35 毫米、60 毫米、100 毫米和 150 毫米。
§ 細(xì)胞培養(yǎng)皿主要用于培養(yǎng)貼壁細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)皿說(shuō)明 | 生長(zhǎng)良好 (cm 2 ) | 工作容積(ml) | 細(xì)胞產(chǎn)量 |
96孔 | 0.32 | 0.1-0.2 | 0.32×10 5 |
48孔 | 1.00 | 0.3-0.6 | 0.8×10 5 |
24孔 | 1.88 | 0.5-1.2 | 1.9×10 5 |
12孔 | 3.83 | 1.0-2.4 | 3.8×10 5 |
6孔 | 9.40 | 2.0-3.0 | 9.5×10 5 |
B。 滾瓶：
§ 為了增加貼壁細(xì)胞數(shù)量，一般使用滾瓶、搖瓶培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的使用與燒瓶基本相同但勞動(dòng)力大大減少。
滾瓶的說(shuō)明 | 生長(zhǎng)面積（cm 2） | 工作容積(mL) | 細(xì)胞產(chǎn)量 |
小的 | 490 | 100-150 | 4.9×10 5 |
標(biāo)準(zhǔn) | 850 | 170-250 | 8.5×10 5 |
制藥 | 1750 | 340-500 | 17.5 X 10 5 |
C . 移液器和移液管：
§ 血清移液管是一種相對(duì)常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)室儀器，用于轉(zhuǎn)移毫升體積的液體。
§ 為了計(jì)算被吸出或分配的液體體積，血清移液管通常沿其側(cè)面有刻度。
§ 這些儀器最常與移液器分液器一起使用，通過(guò)產(chǎn)生部分真空來(lái)增強(qiáng)液體轉(zhuǎn)移。
§ 根據(jù)您想要通過(guò)的體積量，相同的移液器分液器可與多種血清移液器尺寸一起使用。
§ 血清移液管通常是可消毒和可重復(fù)使用的，可以是塑料的、無(wú)菌的、一次性的或玻璃的。
§ 對(duì)于液體的轉(zhuǎn)移可使用移液器來(lái)進(jìn)行操作。
蘇州阿爾法生物13年專注于生命科學(xué)儀器和試劑耗材的供應(yīng)，產(chǎn)品包括生物安全柜、超凈臺(tái)、細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器、移液器、 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備、二氧化碳培養(yǎng)箱、流式細(xì)胞儀、發(fā)酵罐、搖瓶、滾瓶、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液器、移液器吸頭等
